Байкальская нерпа (Pusa sibirica) – единственное эндемичное (обитающее на определенном ограниченном ареале. – Прим. ред.) водное млекопитающее Байкала. Нерпа занимает исключительно важное место в экосистеме озера, так как самочувствие этого животного – своеобразный индикатор экологической обстановки.
Отдел бактериальных и паразитарных заболеваний Иркутской МВЛ несколько лет изучает микробиологические, паразитологические, микологические проблемы байкальской нерпы. Сейчас проводится глубокое исследование таксономической (классификационной. – Прим. ред.) характеристики микроорганизмов с определением их вирулентности (патогенности. – Прим. ред.).
Исследование
Объект исследования – 14 нерп, содержащихся в нерпинариях поселка Листвянка и города Иркутска Иркутской области.
Отбор проб (смывы из носовой, ротовой полостей и прямой кишки), выделение культур микроорганизмов, их идентификацию проводили по общепринятым методикам. Определение вирулентности тестируемых микроорганизмов оценивали по их способности вызывать гибель белых мышей. Статистическую обработку данных результатов проводили с использованием общепринятых критериев статистики. Из смывов ротовой, носовой полостей и прямой кишки нерпы был изолирован 141 микроорганизм, принадлежащий в 56,7% случаев к грамположительным микроорганизмам и в 43,3% – грамотрицательным.
В результате исследований было выделено 16 видов микроорганизмов. Из носовой полости было выделено 13 изолятов (выделенная культура микроорганизма. – Прим. ред.). Микробиоценоз ротовой полости нерпы был представлен 9 изолятами. При тестировании на плазмокоагуляцию (воздействие лазерным лучом. – Прим. ред.) микроорганизмов из рода Staphylococcus получены следующие результаты. Отрицательную реакцию на плазмокоагуляцию, то есть отсутствие свертывания плазмы, наблюдали в 77,3% случаев, у 8 штаммов Staphylococcus epidermidis и 9 штаммов Staphylococcus warneri. Положительную плазмокоагуляцию наблюдали у 5 штаммов Staphylococcus aureus.
При изучении вирулентности микроорганизмов, выделенных от здоровых нерп, in vivo (в естественных условиях. – Прим. ред.) сделано 105 биопроб. При этом протестировано 105 штаммов, в том числе непатогенных штаммов E. coli – 36, Morganella morganii – 1, Proteus hauseri – 4, Proteus mirabilis – 4, Proteus vulgaris – 2, Pseudomonas aeruginosa – 9, Psychrobacter sanguinis – 1.
При тестировании 4 штаммов Proteus mirabilis лабораторные животные заболевали в первые сутки. Следует отметить, что во всех случаях при тестировании in vivo условно-патогенной микрофлоры, выделенной от здоровых животных, в течение 10-дневного наблюдения не было отмечено ни одного случая гибели подопытных животных.
При тестировании in vivo 42 штаммов Clostridium perfringens и 2 штаммов Plesiomonas shigelloides установлено, что во всех случаях (100%) в течение 24 часов наступала гибель лабораторных животных. После гибели мышей проводилось их вскрытие и бактериологическое исследование материала, сопровождавшееся высевом типичных колоний.
Все эксперименты на животных проводились в строгом соответствии с межгосударственными стандартами по содержанию лабораторных животных и уходу за ними ГОСТ 33216-2014 и ГОСТ 33215-2014, принятыми Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации.
Результаты исследования
В результате проведенных исследований из смывов ротовой, носовой полостей и прямой кишки нерпы были изолированы 16 видов микроорганизмов: Clostridium perfringens, Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Staphylococcus warneri, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Proteus hauseri, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Plesiomonas shigelloides, Bacillus licheniformis, Corynebacterium auriscanis, Morganella morganii, Psychrobacter sanguinis, Enterobacter cloacae.
Микрофлора, выделенная из носовой полости, была представлена 13 изолятами: Bacillus licheniformis, Clostridium perfringens, Corynebacterium auriscanis, Enterobacter cloacae, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Plesiomonas shigelloides, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus warneri.
Микробиоценоз ротовой полости нерпы был представлен 9 изолятами: Bacillus licheniformis, Clostridium perfringens, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Proteus hauseri, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Staphylococcus warneri, Staphylococcus epidermidis. Микробиоценоз прямой кишки – 10 изолятами: Clostridium perfringens, Escherichia coli, Morganella morganii, Plesiomonas shigelloides, Proteus hauseri, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus warneri.
Микроорганизмы, выделенные из сердца, были чувствительны ко всем антибиотикам в 38,7% случаев (ампициллину, амоксициллину, гентамицину, амикацину, ципрофлоксацину, офлоксацину, фурадонину, бензилпенициллину, оксациллину, эритромицину, клиндамицину, линезолиду), в 6,5% случаев все микроорганизмы были устойчивы к тикарциллину и фузидину.
При изучении вирулентности микроорганизмов установлено, что 58% штаммов не вызывали гибели лабораторных животных, в основном это были представители условно-патогенной микрофлоры. Тогда как 42% штаммов были патогенными, из которых выявлено 2 штамма Plesiomonas shigelloides и 42 штамма Clostridium perfringens.
При тестировании на плазмокоагуляцию микроорганизмов из рода Staphylococcus получены следующие результаты: отрицательную реакцию на плазмокоагуляцию наблюдали в 77,3% случаев (у 8 штаммов Staphylococcus epidermidis и 9 штаммов Staphylococcus warneri), положительную плазмокоагуляцию наблюдали у 5 штаммов Staphylococcus aureus.
По результатам исследований можно сделать вывод о том, что многие виды микроорганизмов находятся в воде и, естественно, присутствуют в живой нерпе. Патогенные свойства микроорганизмов будут исследоваться специалистами Иркутской МВЛ в условиях постоянного мониторинга экосистемы Байкала, от которой зависит здоровье байкальской нерпы.
